质粒转染技术 快手免费双击秒 -在线抖音播放量网站 - 快手0.5元一万赞

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Lonza电转仪利用不断优化的Nucleofection技术——在细胞膜上电击穿个小孔，并且综合优化了各种特定细胞转染程序与转染液，使得转染物质(如DNA，RNA等)不仅可以进入细胞质，而且可直接通过核膜进入细胞核。这使得细胞的转染效率最高可达99%，是十分简单高效的转染仪器。

其主要的应用领域有免疫和血液、神经科学、干细胞、诱导多功能干细胞、癌症肿瘤、心脏呼吸和代谢疾病等领域，适用范围十分广泛。

目前，LONZA 4D-Nucleofector已大量应用于CAR-T细胞的研究中。其突破性的靶向核仁技术可以直接转染目的基因入核（以及胞质）。

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用LONZA 4D-Nucleofector细胞核转染系统，将GFP标记的质粒转染新生儿皮肤成纤维细胞（NHDF-neo),两小时后用 3.5%PFA固定质粒转染技术，并聚焦显微镜可观察到GFP蛋白在细胞核内表达。

Lonza电转仪适配多个系统模块，明星款有Lonza 4D-Nucleofector核转染系统。可用于兔疫细胞、干细胞、神经细胞、内皮细胞等较难转染的原代细胞和各类细胞系中，其不依赖于病毒感染以及细胞有丝分裂，可加快基因表达，已成功转染1200余种细胞系、130余种原代细胞，多数细胞系转染效率可高达50-70%，部分原代细胞转染效率可超过90%。

明星产品

①Core Unit 核心单元控制 4DNucleofectorTM 系统

运行软件，设计并保存实验

最多可链接 5 个功能模块 Core x y 96 shuttle CTU

通过 USB 端口实现软件升级与数据库扩容

②X Unit 悬浮细胞转染模块

主要转染原代细胞，也可以用于DNA、RNA和蛋白质的转染。5种试剂盒可覆盖所有原代细胞，利用数据库中的细胞转染无需进行实验优化，操作更加简单便捷。

③Y Unit 帖壁细胞原位转染模块

细胞能够在贴壁状态下直接转染只需要将细胞培养在 24 孔板中，在转染时将电极板插入即可。

转染前后，细胞始终置于24 孔板中可在细胞生长的任何时期进行转染。无需消化，成活率高，转染效率最高可达 70%。

与 Cloneitcs原代动物神经元细胞兼容简化试剂盒， 我们提供了两种转染试剂 AD1 和 AD2 ，可适用于所有细胞类型也适用于其他类型细胞和应用，如内皮细胞、成纤维细胞、心肌细胞、巨噬细胞、血管组织等。

与传统的转染技术相比较，lonza的主要优势为基因转染效率高，转染与细胞分裂无关、可实现非分裂细胞的转染，如神经元细胞，具有通用性：可转染质粒 DNA DNA 单链，mRNA 或是 siRNA ，可适用于原代细胞或是细胞系，还具有更快的基因表达。

采用传统电孔法和核转染法转染人自然杀伤细胞系NKL, 5 x 106的NKL细胞被转化成2.5 ug的pmaxGFP载体。

核转染：核转染溶液溶液V；程序0-014，竞争电转B：:25 mV, 96 u F。

（数据由美国马里兰州洛克维尔国立卫生研究院免疫遗传学实验室约翰·科里根博士提供）

通过分析上图可得结果如下，24小时后用流式细胞仪检测转染效率，与传统电穿孔法相比质粒转染技术，用核切法转染细胞的转染效率明显提高。转染18小时后测定细胞的活力也优于传统的电孔法。可见与传统的电击转染相比，核转染具有更加高效、更加优化的的转染能力。

Lonza作为核转染领域专家，深耕细胞领域四十多年，提供的全套的核转染服务。