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切片机是一种微型设备,可将样品固定在适当的位置,同时一把重且非常锋利的玻璃或钻石刃刀可以切下几十微米厚的切片。
切片机
切片机是一种专门的精密切割仪器,可准确、重复地从一块嵌入组织中切片。不同种类的切片机用于切片石蜡和塑料包埋组织,以及用于切片冷冻组织的专用切片机。在任何切片机中病理切片技术,锋利的刀和组织块彼此保持固定关系。每次组织通过刀时,它都会将组织块推进预设的量——切片厚度。
对于冷冻切片,切片厚度通常为 8 到 15 ,蜡切片为 4–10 微米,塑料组织切片为 0.5–3 微米。在电子显微镜下,切片必须非常薄,比蜡切片薄约 200 倍。透射电子显微镜 (TEM) 中使用的塑料切片通常在 60-100 纳米范围内切割。
食品切片机
对于切片机切片,样品需要使用醛进行化学固定,在乙醇中脱水,使用二甲苯澄清并嵌入石蜡中。大多数样品通常固定在 10% 的福尔马林溶液中(由大约 4% 的甲醛缓冲液用甲醇稳定),通常被称为福尔马林固定石蜡包埋 (FFPE) 样品。
硬组织切片机
使用所描述的化学品将导致整体超微结构保存不佳。然而,这种技术保留了组织的微观结构,它仍然被认为是人类和动物疾病模型病理学评估的金标准。通常,不可能为 CLEM 计划样本收集,需要进一步调查预先准备的 FFPE 样本。尽管在最佳超微结构保存方面并不理想,但这些样本仍可用于 CLEM 来回答某些生物学问题。如果可以进行计划,强烈建议使用未用甲醇稳定的电子显微镜级醛进行样品固定。
小型切片机
切片机用于制作薄薄的组织切片(通常为 4 微米,但可以为 2-10 微米)。将切割的组织漂浮在水浴上病理切片技术,以消除组织中的皱纹和变形,并在载玻片上拾取。水浴的温度取决于蜡的类型,通常比蜡的熔点低 5-9°C。载玻片可以带电或不带电,具体取决于被切割的组织类型和组织染色方案。一个 0.3 厘米厚的组织样本可以制作多达 750 个载玻片。接下来,载玻片被烘烤并准备好染色。
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